Cos’è l’immunoistochimica?

L’immunoistochimica è una tecnica di laboratorio utilizzata per identificare e studiare la presenza e la distribuzione di specifiche proteine all’interno di tessuti biologici. Questa metodologia combina principi di immunologia e istochimica, consentendo di visualizzare le proteine di interesse attraverso l’uso di anticorpi che si legano in modo specifico alle stesse. Grazie a questa tecnica, è possibile ottenere informazioni dettagliate sulle funzioni delle proteine all’interno delle cellule e dei tessuti, contribuendo così alla comprensione dei meccanismi patologici e fisiologici che regolano il funzionamento del nostro organismo.

Panoramica

Che cos’è l’immunoistochimica (IHC)?

L’immunoistochimica (IHC) è una tecnica di laboratorio utilizzata dai patologi per cercare segni di malattia in un campione di tessuto. Un patologo utilizza test di laboratorio per diagnosticare condizioni mediche.

Come parte della diagnosi, un operatore sanitario può rimuovere il tessuto e inviarlo a un laboratorio per i test. Ad esempio, possono rimuovere parte di un tumore e inviarlo a un laboratorio per testare le cellule tumorali. Questa si chiama biopsia. Un IHC è solo uno dei metodi che un patologo può utilizzare per studiare il campione una volta arrivato al laboratorio.

L’IHC è il tipo più comune di immunocolorazione. L’immunocolorazione prevede l’uso di anticorpi e marcatori speciali per “etichettare” parti di un campione di tessuto in modo che siano più facili da identificare per i patologi.

La parola “immunoistochimica” fornisce indizi su ciò che è coinvolto:

• Immunitario significa relativo al tuo sistema immunitario. Il tuo sistema immunitario rileva sostanze nel tuo corpo (chiamate antigeni). Produce anticorpi per trovare e distruggere antigeni che non appartengono, come agenti patogeni (virus, batteri, funghi e parassiti) e cellule tumorali. Un IHC utilizza le proprietà di ricerca dell’antigene degli anticorpi per rilevare e afferrare gli antigeni in un campione di tessuto. Gli anticorpi colorano il campione in modo che il patologo possa vedere gli antigeni a cui sono attaccati se osservati al microscopio.
• Storia significa tessuto. Un IHC esamina un campione di tessuto.
• Chimica studia i minuscoli elementi costitutivi che compongono tutta la materia, compresi i tessuti umani. Un IHC utilizza un microscopio per vedere antigeni altrimenti invisibili che potrebbero indicare malattie.

Quando viene eseguita l’immunoistochimica?

Un IHC può essere utilizzato per:

• Diagnosticare una condizione: Un IHC consente agli operatori sanitari di diagnosticare condizioni come il cancro. Può aiutare gli operatori a determinare il tipo di cancro (ad esempio carcinoma, melanoma o sarcoma). Consente inoltre agli operatori sanitari di individuare le origini del cancro che si diffonde (cancro metastatico).
• Determinare la prognosi: Un IHC può determinare quanto sia ad alto rischio o aggressivo un cancro. Può anche aiutare gli operatori a stadiare e classificare il cancro. Queste informazioni possono aiutare gli operatori a determinare le migliori opzioni di trattamento.
• Prevedere la risposta al trattamento: Un IHC può identificare le caratteristiche del tessuto tumorale che forniscono indizi su come il cancro può rispondere al trattamento. Ad esempio, i patologi possono identificare i tumori al seno e alla prostata che probabilmente crescono in presenza di determinati ormoni, come gli estrogeni e il testosterone. Questi tumori possono rispondere meglio ai trattamenti che bloccano questi ormoni (terapia ormonale).
• Monitorare la risposta al trattamento: Un IHC consente ai fornitori di monitorare se i trattamenti stanno funzionando per liberare il tuo corpo dalla malattia.

I ricercatori eseguono anche l’IHC per sviluppare nuovi trattamenti farmacologici. L’IHC aiuta i ricercatori a saperne di più su come funzionano le parti più piccole del tuo corpo, come le cellule e le molecole al loro interno. L’IHC fornisce informazioni su come le malattie influenzano questi processi e quali trattamenti possono aiutare.

Quali malattie possono essere diagnosticate mediante immunoistochimica?

Gli operatori sanitari utilizzano più comunemente l’IHC per diagnosticare il cancro, ma può anche diagnosticare altre condizioni, tra cui il morbo di Alzheimer, il morbo di Parkinson e la distrofia muscolare.

Può identificare anche gli agenti patogeni che causano infezioni. La prima colorazione IHC riuscita avvenne nel 1941, quando i ricercatori (Coons, et al.) identificarono i batteri associati alla polmonite (pneumococco) in un campione di tessuto.

Dettagli della prova

Come funziona il test?

Un IHC utilizza anticorpi per rilevare un antigene bersaglio in un campione di tessuto. L’antigene bersaglio è un marcatore che indica la presenza di una malattia specifica. Se l’anticorpo riconosce l’antigene, si legherà ad esso. Il processo di legame è simile a quello di una serratura (antigene) e di una chiave (anticorpo). Se l’anticorpo si lega all’antigene, il campione di tessuto si colorerà di un certo colore se osservato al microscopio.

Funziona così:

• Un patologo collega un anticorpo a un enzima che reagirà se l’anticorpo si lega all’antigene bersaglio.
• L’anticorpo si lega all’antigene bersaglio se è presente.
• L’attaccamento fa reagire l’enzima.
• La reazione fa sì che il campione di tessuto si macchi di un certo colore se osservato al microscopio.

Affinché i risultati siano affidabili, i patologi devono completare accuratamente più passaggi.

Preparazione del campione

La preparazione del campione garantisce che si colori correttamente. Se è presente un antigene, risalta in segmenti colorati sullo sfondo. Per preparare il campione, i patologi:

1. Preservare il tessuto. Il tessuto è costituito da cellule che muoiono nel tempo. Preservare o “fissare” il tessuto rallenta il processo. Il fissaggio mantiene la struttura del tessuto, quindi si colora in modo efficace. Una delle sostanze più comuni utilizzate per fissare i tessuti è la formalina, una soluzione di formaldeide.
2. Assicurarsi che gli antigeni siano accessibili. Il processo di fissazione a volte può bloccare parti dell’antigene in modo che l’anticorpo non possa legarsi ad esso. Un processo chiamato recupero dell’antigene può riesporre i punti di legame dell’antigene in modo che gli anticorpi possano attaccarsi.
3. Blocca strutture simili dove un anticorpo può legarsi. A volte, gli anticorpi si legano a sostanze simili nella struttura all’antigene bersaglio, ma che non sono le stesse. I patologi bloccano preventivamente queste strutture in modo che l’anticorpo si attacchi solo all’antigene bersaglio.

Selezione degli anticorpi

I patologi selezionano gli anticorpi noti per legarsi all’antigene bersaglio. L’IHC utilizza anticorpi policlonali o anticorpi monoclonali.

• Anticorpi policlonali:Un mix di diversi anticorpi. Questi anticorpi possono attaccarsi a più siti di legame su un antigene.
• Anticorpi monoclonali: Copie identiche dello stesso anticorpo. Gli anticorpi monoclonali si legheranno solo a un sito di legame specifico su un antigene.

Rilevazione dell’antigene

I patologi preparano l’anticorpo per colorare il tessuto contenente l’antigene.

Patologi:

1. Collegare gli anticorpi a un enzima. Esempi di enzimi includono la perossidasi di rafano e la fosfatasi alcalina.
2. Aggiungere l’anticorpo con l’enzima al campione di tessuto.
3. Osserva il campione al microscopio.
4. Cerca la colorazione che indica la presenza dell’antigene.

Il primo IHC di successo ha utilizzato un processo simile. Invece di collegare l’anticorpo a un enzima, i ricercatori lo hanno collegato a un fluoroforo. Un fluoroforo assorbe la luce e la riflette. Il fluoroforo colora il campione se osservato al microscopio a fluorescenza. Questa tecnica è ora considerata un diverso tipo di immunocolorazione chiamata immunofluorescenza.

Quali sono i limiti dell’immunoistochimica?

Non esistono linee guida standard per ogni fase dell’immunoistochimica. Diversi laboratori utilizzano tecniche diverse, il che significa che i risultati possono variare.

Inoltre, recenti ricerche hanno dimostrato che non tutti gli anticorpi disponibili per l’IHC fanno quello che dovrebbero, ovvero rilevare l’antigene bersaglio in un campione. Se ci sono problemi con gli anticorpi, un test può dare risultati falsi, tra cui:

• Falso positivo: Un IHC rileva un antigene che non è presente.
• Falso negativo: Un IHC non rileva un antigene del genere È presente.

I laboratori devono disporre di controlli di qualità in modo che ogni passaggio preservi il tessuto e garantisca una colorazione di alta qualità. Per migliorare la precisione dell’IHC, i patologi possono testare gli anticorpi su tessuti noti per contenere l’antigene bersaglio per assicurarsi che si colorino prima di testare un campione di tessuto sconosciuto.

Quanto è accurata l’immunoistochimica?

Se eseguita correttamente e con controlli di qualità in atto, l’immunoistochimica è un metodo affidabile per la diagnosi del cancro. Uno studio riporta che l’IHC può identificare con precisione la posizione primaria del cancro metastatico con una precisione compresa tra il 70% e il 90%.

dettagli aggiuntivi

L’immunoistochimica è una biopsia?

No, ma sono imparentati. L’immunoistochimica è un tipo di tecnica di laboratorio che un patologo può eseguire su un campione di tessuto raccolto per una biopsia.

L’immunoistochimica (IHC) consente ai patologi di ottenere qualcosa di straordinario. Permette loro di vedere segni di malattia invisibili ad occhio nudo. L’IHC utilizza i potenti combattenti del tuo corpo, gli anticorpi, per esporre sostanze microscopiche e dannose che causano malattie. È solo un metodo che consente agli scienziati di studiare, diagnosticare e, soprattutto, combattere il cancro dal laboratorio.

In conclusione, l’immunoistochimica è una tecnica essenziale in campo biomedico che permette di identificare e visualizzare specifiche proteine all’interno dei tessuti cellulari. Grazie alla combinazione di anticorpi e tecniche di colorazione, è possibile individuare marcatori di patologie e studiare processi biologici a livello microscopico. Questo metodo di analisi è fondamentale per la ricerca scientifica, la diagnosi medica e lo sviluppo di nuove terapie. La sua importanza nel campo della medicina è in continua crescita, evidenziando la sua grande utilità e versatilità nell’ambito della biologia cellulare e molecolare.